前言

近日北京大學腫瘤醫院團隊在J Nucl Med雜志上報道了新型納米抗體分子探針⁶⁸Ga-NC-BCH的首次臨床結果。根據劑量學研究，⁶⁸Ga-NC-BCH的有效輻射劑量遠低于124I-18B10(10L)。所有結果顯示，⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT是一種安全、無創的成像方法，可用于檢測接受CLDN18.2靶向治療的患者中的CLDN18.2，在選擇 CLDN18.2 靶向治療策略和監測治療反應方面具有巨大潛力。

分子探針⁶⁸Ga-NC-BCH的靶頭納米抗體ACN376由成都阿帕克生物研發獲得。

Claudin 18.2

Claudin 18.2（CLDN18.2）是一種四次跨膜蛋白，屬于整合素膜蛋白家族中的一員，主要存在于胃黏膜上皮細胞表面。在正常情況下，Claudin 18.2通過與其他細胞連接蛋白相互作用，幫助維持細胞間的結構完整性和功能。然而，在惡性腫瘤發生時，細胞間連接可能被破壞，導致Claudin 18.2的表位暴露在腫瘤細胞表面上，能夠與靶向其的藥物結合，以實現診斷或治療效果。研究表明，在胃癌患者中，CLDN18.2蛋白的表達率為40%~80%，而在胰腺癌患者中則為50%~70%。

盡管CLDN18.2在腫瘤治療中具有潛在的重要作用，但是缺乏針對其的標準檢測方法。大多數檢測方法都依賴于免疫組化技術，這種方法對組織的侵入性較強，受限于樣本取樣部位及樣本數量，無法全面反映腫瘤內 CLDN18.2的表達水平。因此，尋找更準確、便捷的檢測方法對于Claudin 18.2在腫瘤治療中的應用具有重要意義。

納米抗體分子探針⁶⁸Ga-NC-BCH

此前報道的臨床結果顯示124I標記的CLDN18.2人源化單克隆抗體124I-18B10(10L)在腫瘤病灶中可檢測到CLDN18.2。然而，由于單克隆抗體的分子量較大，導致成像周期較長，無法在一天內完成，要求患者具有較高的依從性。與傳統抗體相比，納米抗體分子量小，具有更快的組織穿透能力和腎臟清除速率，使得注射探針后能在1小時內獲得高對比度的圖像，讓患者能夠在1天內完成整個成像工作流程，大大提高了患者的依從性并減少了輻射暴露。

⁶⁸Ga-NC-BCH的合成與表征

靶向CLDN18.2的納米抗體ACN376-GGGGC與Maleimidomonoamide-NOTA特異性地結合。NOTA與納米抗體的比率約為1:1（圖1）。⁶⁸Ga-NC-BCH與CLDN18.2蛋白的解離常數為27.85 nmol/L。AGSCLDN18.2細胞對⁶⁸Ga-NC-BCH的攝取量在120分鐘時比AGS細胞高出4.93倍。⁶⁸Ga-NC-BCH的放射化學得率超過95％，放射化學純度超過98％（圖2）。 體外穩定性（超過6小時）方面 ⁶⁸Ga-NC-BCH在0.01M磷酸鹽緩沖鹽溶液和5％人血清白蛋白中的放射化學純度超過98％。 

圖1. (A) 合成⁶⁸Ga-NC-BCH。(B) ⁶⁸Ga-NC-BCH與CLDN18.2蛋白的結合親和力測定。(C) ⁶⁸Ga-NC-BCH在AGSCLDN18.2和AGS細胞中的細胞攝取。

圖2. ⁶⁸Ga-NC-BCH在純化前后的放射性薄層層析（Radio-TLC）和⁶⁸Ga-NC-BCH的體外穩定性

⁶⁸Ga-NC-BCH的臨床前研究

生物分布、藥代動力學和安全性研究顯示，⁶⁸Ga-NC-BCH在小鼠體內主要集中在胃和腎臟，腫瘤攝取量較高。藥物從血液中迅速清除，半衰期為22.77分鐘。注射高劑量的藥物后未觀察到明顯毒性。

圖3. (A) 不同實驗組小鼠器官的1小時SUVmean值以及腫瘤/肌肉（T/M）比率。

(B) ⁶⁸Ga-NC-BCH在注射后2小時在AGSCLDN18.2和AGS腫瘤模型中的生物分布情況，以及在KM小鼠中的藥代動力學研究。

(C) 對AGSCLDN18.2胃（+++）、AGS胃（+++）、AGSCLDN18.2腫瘤（++）和AGS腫瘤（-）中CLDN18.2表達的免疫組化分析。

⁶⁸Ga-NC-BCH的臨床研究

⁶⁸Ga-NC-BCH的人體內分布

從2022年7月到11月，共有11名患者參與研究，其中10名患有晚期胃癌，1名患有晚期結腸癌，所有患者CLDN18.2表達率均達到40%以上。注射⁶⁸Ga-NC-BCH后，未觀察到與示蹤劑相關的不良事件。 所有患者均接受了⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT檢查，注射劑量范圍為56.61到177.97 MBq。觀察到腎臟、膽囊、胃、脾臟和肝臟的最高器官攝取量。⁶⁸Ga-NC-BCH的有效劑量估計為0.042 ± 0.02 mSv/MBq，低于常規18F-FDG PET/CT的輻射劑量。動態掃描顯示觀察器官的快速攝取和隨后逐漸下降，在胃和腎臟中積累明顯。60分鐘時的靜態全身PET/CT掃描顯示正常組織中的攝取量低，而陽性病灶的攝取量隨時間逐漸增加。值得注意的是，由于CLDN18.2通常埋藏在胃粘膜中，以往的基于單克隆抗體的探針，如89Zr-DFO-TST001和124I-18B10(10L)，在正常胃組織中無法結合CLDN18.2；此次研究發現胃壁完好的患者顯示出胃粘膜中⁶⁸Ga-NC-BCH的顯著攝取，這是針對CLDN18.2的全身PET成像中的新發現。

圖4. (A) 0-42分鐘內⁶⁸Ga-NC-BCH的SUVmean動態變化（n=5）。

(B) 在42分鐘時不同器官中的⁶⁸Ga-NC-BCH攝取排序（n=5）。

(C) 展示⁶⁸Ga-NC-BCH在腫瘤內的動態全身PET/CT成像，以優化成像窗口。

⁶⁸Ga-NC-BCH的腫瘤攝取

通過⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT，檢測到9名患者中共215個CLDN18.2陽性病灶。無論CLDN18.2表達位置如何，其陽性病灶的平均SUVmax沒有顯著差異。陽性病灶主要分布在淋巴結、腹膜、肝臟和骨骼。肝轉移中的⁶⁸Ga-NC-BCH攝取最高，其次是淋巴結和骨骼。未接受CLDN18.2治療的患者的陽性病灶攝取明顯高于接受治療者。不同CLDN18.2表達強度的患者陽性病灶的SUVmax存在顯著差異；同一患者的轉移病灶中，CLDN18.2表達也存在差異。

圖5. (A) 不同轉移病灶中的⁶⁸Ga-NC-BCH腫瘤攝取。

(B) ⁶⁸Ga-NC-BCH和18F-FDG的腫瘤/肝臟攝取比（tumor-to-liver ratio）。

(C) 不同轉移病灶中⁶⁸Ga-NC-BCH和18F-FDG的腫瘤-非腫瘤比較。

⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT有效檢測到小的腹膜和胸膜轉移病灶

⁶⁸Ga-NC-BCH和18F-FDG兩種方法檢測到的所有陽性病灶的腫瘤-非腫瘤（T/NT）比率存在顯著差異。亞組分析顯示，⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT檢測到的淋巴結和腹膜轉移的T/NT比率顯著高于18F-FDG PET/CT。例如，患者9(晚期胃癌,女性)左側胸膜轉移結節和增厚的腹膜在18F-FDG PET/CT上未顯示明顯攝取，而在⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT上顯示高攝取。另外，患者4（結腸癌，男性）其腹部轉移淋巴結在18F-FDG PET/CT上顯示輕微攝取，而在⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT上顯示高攝取。淋巴結和腹膜是晚期胃癌的最常見轉移部位。由⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT檢測到的病變的T/NT比例顯著較高，這種高比例更有利于病變的檢測。

圖6. (A) 患者9女性晚期胃癌，CLDN18.2表達水平為40%，2+。左側胸膜轉移結節（藍色箭頭）和增厚腹膜（白色箭頭）在18F-FDG PET/CT上未顯示明顯攝取，而在⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT上顯示高攝?。⊿UVmax分別為3.1 [紅色箭頭] 和5.7 [綠色箭頭]）。

(B) 患者4結腸癌，其CLDN18.2表達水平為40%，3+。在18F-FDG PET/CT上，腹部轉移淋巴結（白色箭頭）顯示輕度攝取SUVmax, 1.4，而在⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT上同一淋巴結（藍色箭頭）顯示高攝取SUVmax，5.6。

小結

本研究采用納米抗體標記短半衰期核素⁶⁸Ga作為放射探針，能夠快速、準確地檢測CLDN18.2表達。在動物模型中顯示出良好的親和力，并且在人體PET/CT成像中表現出安全性和有效性。病人檢測顯示，與傳統的18F-FDG PET/CT相比，⁶⁸Ga-NC-BCH PET/CT能夠更準確地檢測到淋巴結和腹膜轉移灶。此外，接受CLDN18.2靶向治療的病變吸收高于未接受治療的病變，且表達水平較高的轉移病變具有更高的SUVmax。這些結果反映出⁶⁸Ga-NC-BCH 在CLDN18.2病灶檢測，靶向治療策略和監測治療反應方面具有巨大潛力。

阿帕克生物具有完善的納米抗體開發平臺和豐富的項目經驗，可提供新型核藥納米抗體定制服務，歡迎合作交流！

參考文獻：

Qi C, Guo R, Chen Y, Li C, Liu C, Zhang M, Zhang C, Zhang X, Hou X, Chen B, Jia B, Yang Z, Shen L, Zhu H. 68Ga-NC-BCH Whole-Body PET Imaging Rapidly Targets Claudin18.2 in Lesions in Gastrointestinal Cancer Patients. J Nucl Med. 2024 Apr 11:jnumed.123.267110. doi: 10.2967/jnumed.123.267110. Epub ahead of print. PMID: 38604764.

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