抗小分子免疫復(fù)合物抗體開發(fā)
免疫分析有競爭與非競爭兩種基本形式,應(yīng)用于小分子檢測的主要是競爭分析形式,非競爭型免疫分析理論上比競爭型具有更高的靈敏度與線性范圍,被分析物的含量與檢測信號在競爭免疫分析中呈負(fù)相關(guān),而在非競爭型免疫分析中呈正相關(guān)。圖1直觀地說明非競爭型免疫分析在檢測靈敏度方面的優(yōu)越性。

圖1 非競爭型分析和競爭型分析靈敏度的對比
Fig.1 The different sensitivities between competitive immunoassay and noncompetitive immunoassay
小分子由于分子量?。?lt;1000Da),表位單一,很難實(shí)現(xiàn)非競爭免疫分析,如何才能實(shí)現(xiàn)非競爭免疫分析呢?研究者發(fā)現(xiàn)一類稱為抗異型抗體(anti-metetype antibody),這類抗體可以識別小分子與抗體結(jié)合形成的新表位。
當(dāng)小分子與抗體結(jié)合后,大于85%的抗原可接近表面積被包埋,只有極小部分與抗體形成異型表位,因而制備異型抗體特別困難。小分子抗體一般來源于鼠單抗,如果再將鼠抗復(fù)合物免疫小鼠,基本不會產(chǎn)生免疫應(yīng)答。常規(guī)需要將鼠抗復(fù)合物免疫兔子,但是兔單抗的開發(fā)無論是雜交瘤,噬菌體展示還是single B,都面臨著效率低的問題。
阿帕克生物基于HTS-Smart Select 平臺,通過免疫小分子復(fù)合物抗體,讓動物產(chǎn)生抗異型抗體,再構(gòu)建酵母展示文庫,通過流式分析,直接分選抗異型抗體,整個過程能夠精細(xì)控制篩選流程,高效篩選高親和力,高特異抗體。
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